一種用于揭示活細(xì)胞結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)的新型偏振熒光探針

東京醫(yī)科牙科大學(xué)(TMDU)的研究人員與海洋生物實(shí)驗(yàn)室(MBL)和RIKEN的科學(xué)家合作，開發(fā)了一種用于活細(xì)胞熒光成像的新技術(shù)，從而使他們?cè)诤Ｐ窃缙谂咛ブ邪l(fā)現(xiàn)了新的肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)。

東京-監(jiān)視單元構(gòu)建塊的對(duì)齊方式對(duì)于了解單元的構(gòu)建方式非常重要。通過(guò)與MBL的成像科學(xué)家合作，研究人員開發(fā)了一種名為POLArIS的新探針，可以對(duì)活細(xì)胞中的分子方向進(jìn)行實(shí)時(shí)成像。

熒光團(tuán)在發(fā)光時(shí)會(huì)發(fā)出偏振光。偏振熒光的取向與熒光團(tuán)的取向緊密相關(guān)。如果感興趣的分子與諸如綠色熒光蛋白(GFP)的熒光標(biāo)簽剛性連接，則來(lái)自熒光團(tuán)的偏振熒光將報(bào)告該分子的方向。

這項(xiàng)研究的主要作者之一Ayana Sugizaki說(shuō)：“在以前的監(jiān)測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)方向的方法中，研究人員需要開發(fā)有效的受約束的GFP標(biāo)簽方法，每種目標(biāo)蛋白質(zhì)可能會(huì)有所不同。”“ POLArIS使用與GFP牢固連接的類似抗體的結(jié)合劑，可以進(jìn)行特異性和通用的限制性標(biāo)記，”另一位主要作者佐藤啟介(Keisuke Sato)補(bǔ)充說(shuō)。該團(tuán)隊(duì)使用市售的Adhiron分子(現(xiàn)已更名為“ Affimer”)作為結(jié)合分子，將GFP與靶蛋白連接起來(lái)，并通過(guò)旋轉(zhuǎn)約束方式連接Adhiron和GFP來(lái)開發(fā)POLArIS(圖1)。因?yàn)榭梢酝ㄟ^(guò)噬菌體展示篩選從分子庫(kù)中輕松選擇與目標(biāo)分子特異性結(jié)合的Adhiron分子，所以POLArIS可以針對(duì)任何目標(biāo)生物分子進(jìn)行設(shè)計(jì)。POLArIS可以在特定的細(xì)胞類型和細(xì)胞器中表達(dá)，將對(duì)研究廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)物，組織和整個(gè)生物體中分子裝配體的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)非常有用。國(guó)立先進(jìn)工業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院(AIST)資深研究員谷谷智美說(shuō)：“從熒光偏振成像的角度來(lái)看，POLArIS具有遺傳優(yōu)勢(shì)，因此具有明顯的優(yōu)勢(shì)。”自從他是MBL的副科學(xué)家以來(lái)，他一直從事這個(gè)項(xiàng)目。POLArIS可以設(shè)計(jì)用于任何感興趣的生物分子。POLArIS可以在特定的細(xì)胞類型和細(xì)胞器中表達(dá)，將對(duì)研究廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)物，組織和整個(gè)生物體中分子裝配體的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)非常有用。國(guó)立先進(jìn)工業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院(AIST)資深研究員谷谷智美說(shuō)：“從熒光偏振成像的角度來(lái)看，POLArIS具有遺傳優(yōu)勢(shì)，因此具有明顯的優(yōu)勢(shì)。”自從他是MBL的副科學(xué)家以來(lái)，他一直從事這個(gè)項(xiàng)目。POLArIS可以設(shè)計(jì)用于任何感興趣的生物分子。POLArIS可以在特定的細(xì)胞類型和細(xì)胞器中表達(dá)，將對(duì)研究廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)物，組織和整個(gè)生物體中分子裝配體的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)非常有用。國(guó)立先進(jìn)工業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院(AIST)資深研究員谷谷智美說(shuō)：“從熒光偏振成像的角度來(lái)看，POLArIS具有遺傳優(yōu)勢(shì)，因此具有明顯的優(yōu)勢(shì)。”自從他是MBL的副科學(xué)家以來(lái)，他一直從事這個(gè)項(xiàng)目。

標(biāo)簽： 活細(xì)胞