使用常規(guī)血液樣本，研究人員開發(fā)了一種極其靈敏的檢測方法，用于檢測和量化患者癌細胞中含有罕見基因突變的 DNA 片段。該測定使用“超選擇性”PCR 引物，實際上忽略了源自患者正常細胞的大量密切相關(guān)的非突變 DNA 片段。這種新的檢測方法比目前的方法更快、更便宜，并且可以在廣泛使用的儀器上進行。研究人員在《分子診斷雜志》的一份新報告中證明了這種方法的實用性。
“這項研究的長期目標(biāo)是開發(fā)高度多重化驗，以便在出現(xiàn)任何癥狀之前及早發(fā)現(xiàn)與癌癥相關(guān)的突變，并應(yīng)用有效的早期治療。這些化驗將使用無創(chuàng)液體活檢(常規(guī)血液樣本)在一個人的年度體檢期間采集，然后將通過高度多重實時或數(shù)字 PCR 技術(shù)分析暫時存在于血液樣本中的 DNA 片段(源自已死亡的細胞)，”首席研究員 Diana Yaneth Vargas 解釋說, MS 和 Fred Russell Kramer, Ph.D.，來自美國新澤西州紐瓦克羅格斯大學(xué)新澤西醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生研究所
當(dāng)前分析液體活檢的技術(shù)包括昂貴、冗長且靈敏度有限的下一代序列分析;或者使用 PCR 技術(shù)，其中突變 DNA 片段和密切相關(guān)的野生型 DNA 片段都被擴增，當(dāng)突變 DNA 片段很少時限制靈敏度。另一方面，SuperSelective PCR 引物的獨特設(shè)計能夠擴增突變 DNA 片段，同時有效防止大量密切相關(guān)的野生型 DNA 片段的擴增。因此，本報告中描述的超選擇性 PCR 檢測非常敏感。
多重超選擇性 PCR 檢測，利用頻繁的非侵入性液體活檢，能夠選擇和隨后修改用于治療個體癌癥的有效靶向療法。此外，在治療后，這些化驗可能有助于監(jiān)測患者以檢測是否存在微小殘留疾病，從而在必要時進行進一步干預(yù)。
為了證明他們的方法的臨床潛力，對來自癌癥患者血漿的六個 DNA 樣本進行了分析。來自五名患者的樣本是不知情的。進行多重超選擇性 PCR 測定以確認(rèn)每個樣品中是否存在特定的人表皮生長因子受體 (EGFR) 突變.選擇這些突變是因為它們的存在決定了哪種靶向治療最有可能對非小細胞肺癌有效。四個樣品對不同的 EGFR 靶突變呈陽性，兩個樣品沒有給出 EGFR 靶突變的信號。將盲樣本揭盲后，發(fā)現(xiàn)兩個陰性樣本來自沒有EGFR突變的患者，而這些樣本是特意提供的作為對照。分析確定了其他樣本中先前已知的突變。值得注意的是，該分析還在一個盲樣本中發(fā)現(xiàn)了一種非常罕見的耐藥突變，這種突變以前不知道存在，這表明需要改變患者的靶向治療。
研究人員說：“這些檢測方法與傳統(tǒng)多重實時PCR的唯一區(qū)別是用 SuperSelective 引物代替了傳統(tǒng)引物。”“這些檢測可以在護理點快速進行，結(jié)果可以立即用于為后續(xù)的臨床決策提供信息。”
標(biāo)簽：
免責(zé)聲明：本文由用戶上傳，與本網(wǎng)站立場無關(guān)。財經(jīng)信息僅供讀者參考，并不構(gòu)成投資建議。投資者據(jù)此操作，風(fēng)險自擔(dān)。 如有侵權(quán)請聯(lián)系刪除！